鉴别非洲猪瘟野毒株与基因缺失疫苗株的三重TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种鉴别非洲猪瘟野毒株与基因缺失疫苗株的 TaqMan 探针荧光定量 PCR 检测方法,根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的 B646L、EP402R、MGF360- 13L 基因序列,分别设计 PCR 引物和 TaqMan 探针,绘制标准曲线,并进行重复性试验、特异性试验、敏感性试验与临床样品检测,建立三重 TaqMan 探针荧光定量PCR 检测方法。 结果显示,以 B646L、EP402R 和 MGF360- 13L 重组质粒为标准品绘制的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数(R²)分别为 0.995、0.997 和 0.997;建立的方法与多种猪常见病原不存在交叉反应,特异性良好;对 B646L、MGF 360- 13L 与 EP402R 基因的检测下限均为 10 copies/ μL,变异系数均<2%,该方法灵敏度高;当临床样品稀释至 10^{- 5}时,即滴度为 10^2.5TCID₅₀/ m L 时仍能检测到病毒粒子,具有较高的临床使用价值。 本研究建立了一种高效、灵敏、特异的 ASF...     

“食”在光州

<正>百里不同风,千里不同俗。每个地方都有独具特色的饮食文化。潢川,古称光州,位于信阳市中部,是古往今来的战略要地。潢川美食里,交融着黄河、长江两大文化体系,兼具着南北方的特点。“食”在光州,细细品味这里的“老十味”与“新五味”,就能感受到来自舌尖上的豫风楚韵。老十味空心贡面空心贡面,又称“光州贡面”,系清油兑水、盐和细面粉,经过拌、揉、