鹅星状病毒和鹅坦布苏病毒双重nano-PCR检测方法的建立及初步应用

为快速鉴别诊断鹅星状病毒(GoAstV)和鹅坦布苏病毒(TMUV),本研究根据 GenBank 上公布的GoAstV 和 TMUV 基因保守区设计了 2 对特异性引物,结合金纳米材料,通过对反应条件的优化,建立了一种可同时检测这两种病毒的双重 nano- PCR 诊断方法。 结果显示,该方法对鹅细小病毒(GPV)、鹅圆环病毒(GoCV)、新城疫病毒(NDV)和禽腺病毒(FAdV)这 4 种鹅常见病毒的扩增结果均为阴性。 该方法对 GoAstV和 TMUV 的最低检测浓度分别为 1.21×10¹copies/ μL 和 1.21×10³ copies/ μL,敏感性较普通 PCR 分别高100 倍和 10 倍。 对 42 份临床样品的检测结果显示,共检出 GoAstV 13 份,TMUV 1 份。 上述结果表明,本研究建立的双重 nano- PCR 方法快速、特异、敏感,可用于鹅星状病毒和鹅坦布苏病毒的临床检测和流行病学调查。