腺病毒载体与慢病毒载体介导EGFP基因转染犬骨髓间充质干细胞效果的比较

为了比较携带增强型绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体与慢病毒载体转染犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)的效率及其对细胞增殖能力的影响,采用全骨髓贴壁法分离培养犬BMSCs。用两种病毒载体分别按不同的感染复数(MOI)转染BMSCs,72h后荧光显微镜下观察,计算转染效率,并用MTT法检测两种病毒载体对BMSCs增殖能力的影响。结果显示,两种病毒载体随着感染复数的增加,对BMSCs的转染效率逐渐增大,对细胞增殖能力的影响也逐渐增加。MOI分别为25、50、100、200、400时,腺病毒载体的转染效率分别为11%、17%、32%、51%、65%,慢病毒载体的转染效率分别为48%、70%、91%、98%、99%。与空白对照组相比,腺病毒载体在MOI=200、慢病毒载体在MOI=400时对BMSCs增殖有显著影响(P0.05)。结果表明,慢病毒载体在不影响细胞增殖能力的感染复数范围内,对犬BMSCs的转染效率明显高于腺病毒载体。