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利用PCR从质粒pGEM TEasy/MDIFN扩增出番鸭IFN α基因cDNA ,将其插入到含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichiapastoris表达载体pPICZαC 3.6kb中 ,测序 ,待其结果正确后 ,将重组质粒转化至酵母X 33,PCR法筛选出Mut+ 表型的转化子置于BMMY培养基中培养。用 5mL/L甲醇诱导表达 4d后 ,经SDS PAGE分析可见 1条约 2 5ku的清晰蛋白条带。试验结果表明pPICZαC3.6kb/MDIFN质粒构建成功 ,并且实现重组酵母高效分泌表达 相似文献
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