免疫鸽群中2株新城疫病毒的分离鉴定及遗传进化分析

为了研究目前免疫鸽群中新城疫病毒(NDV)感染发病的原因,对2011年从江苏省和湖南省2个免疫过的发病鸽场分离到的2株鸽源NDV进行了生物学特性的测定以及遗传进化分析,并将其与疫苗株La Sota进行交叉中和试验。结果显示,NT-10株为强毒株,HuN株为中等毒力。对其F基因的遗传进化分析表明,二者均为Ⅵb亚型NDV,均为强毒裂解位点,F蛋白上有3个区别于其他基因型的特征性氨基酸位点,即132S,259H,380N。中和试验结果表明,2个NDV分离株与La Sota的抗原性差异很大。结果表明,Ⅵb亚型仍然是鸽群中新城疫病毒的主要流行株,该亚型具有明显的宿主感染特异性;鸽源Ⅵb亚型NDV分离株与La Sota的抗原性差异较大,这可能是免疫鸽群中发生NDV感染的重要原因之一,有必要研制用于预防鸽群中Ⅵb亚型NDV感染的新型疫苗。     

鉴别非洲猪瘟野毒株与基因缺失疫苗株的三重TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种鉴别非洲猪瘟野毒株与基因缺失疫苗株的 TaqMan 探针荧光定量 PCR 检测方法,根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的 B646L、EP402R、MGF360- 13L 基因序列,分别设计 PCR 引物和 TaqMan 探针,绘制标准曲线,并进行重复性试验、特异性试验、敏感性试验与临床样品检测,建立三重 TaqMan 探针荧光定量PCR 检测方法。 结果显示,以 B646L、EP402R 和 MGF360- 13L 重组质粒为标准品绘制的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数(R²)分别为 0.995、0.997 和 0.997;建立的方法与多种猪常见病原不存在交叉反应,特异性良好;对 B646L、MGF 360- 13L 与 EP402R 基因的检测下限均为 10 copies/ μL,变异系数均<2%,该方法灵敏度高;当临床样品稀释至 10^{- 5}时,即滴度为 10^2.5TCID₅₀/ m L 时仍能检测到病毒粒子,具有较高的临床使用价值。 本研究建立了一种高效、灵敏、特异的 ASF...