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20 0 2年 8~ 9月 ,广东省陆丰市城东镇淡水、墩头 2村 6户农民饲养的山羊发生一种以全身皮肤出现疹块为特征的传染病。经临床观察、病理解剖和实验室诊断 ,确诊为山羊痘。1 流行病学调查6户农民共饲养山羊 134只 ,品种为本地黑山羊。均采取固定地方、自由放牧的方式喂养 ,饲料以青绿多汁草料为主 ,自制精料为辅。 2 0 0 2年 8月 9日墩头村 1户农民饲喂的山羊首先发病 ;数日后 ,该村另外 3户农民家的山羊也开始发病 ;十几日后 ,相临的淡水村有 2户农民饲喂的山羊也发病。发病高峰期在首例山羊发病后的 10~ 2 0d ,发病率高达5 0 .0 0 %~ … 相似文献
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牛分枝杆菌ESAT-6基因和CFP-10基因在大肠杆菌中的融合表达 总被引:2,自引:0,他引:2
以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得了ESAT-6和CFP-10两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)将ESAT-6基因和CFP-10基因通过(Gly4Ser)3接头连接,得到了融合基因.将融合基因片段先克隆于pMDl8-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a(+)中,通过限制性内切酶消化、菌液PCR鉴定、序列分析证实得到含预期序列的重组质粒pET-ESAT-6-CFP-10;该质粒转化BL21(DE3);经IPTG诱导,表达出了40 ku的融合蛋白;用Ni螯合层析方法纯化该蛋白,经SDS-PAGE检测,出现了清晰的单一条带;Western-blotting试验结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应.结果表明,ESAT-6基因和CFP-10基因在大肠杆菌中融合表达成功并具有良好的反应原性. 相似文献
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