副猪嗜血杆菌外膜蛋白D15基因的原核表达及其表达产物的免疫原性

根据GenBank中登录的副猪嗜血杆菌(HPS)D15基因鸟枪序列(登录号:NZ_ABKM01000005)设计1对特异性引物,以HPS5型SP毒株DNA为模板,通过PCR方法扩增了D15基因。将其进行T-A克隆,构建pMD18D15质粒并进行序列测定和分析。结果表明,D15基因含有一个2418bp的开放阅读框,编码805个氨基酸,与D15基因参考序列的同源性为99.9%。该HPSD15基因的推导氨基酸序列具有典型Omp85蛋白家族的拓扑结构特征。以pMD18D15质粒为模板,用PCR方法扩增HPSD15基因,并将其克隆到pET-28a(+)中,构建pETD15原核表达质粒,将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)后,用IPTG诱导重组菌,并用SDS-PAGE和Western-blot检测诱导物。结果表明,pETD15重组表达质粒在大肠杆菌中实现了高效表达,融合蛋白的分子质量约为94ku,融合蛋白能被HPS阳性血清识别,提示该融合蛋白具有反应原性。昆明小鼠和豚鼠免疫试验结果表明,D15重组蛋白具有一定的诱导免疫保护反应的能力。     

中国旅游业应对WTO的基础优势和对策措施

加入WTO,将会加快我国旅游经济融入全球经济一体化的进程,它不仅会给我国旅游业带来空前的机遇,更会带来巨大的挑战。在客观分析中国旅游业现有优势的基础上,综合运用总体战略对策、政府管理对策、企业经营对策、人力资源对策和技术对策,将使我们克服妄自菲薄的心理,对未来的发展充满信心。同时使中国旅游业找到成功发展之路。     

我国政府公关活动浅论

我国政府公关活动具有四个方面的特征 ,即利益原则的至上性、活动目的的明确性、信息传播的顺通性以及公关领域的广泛性。有效的政府公关有利于我国政府形象的塑造 ;有利于我国政治民主化进程的加快 ;有利于我国政府职能的发挥。加强我国政府的公关活动 ,需要进一步树立良好的地方政府领导者形象 ,建立精干、高效的政府机构 ,推进政府决策民主化、科学化     

副猪嗜血杆菌Neu基因的克隆表达及表达产物的免疫原性

为研究副猪嗜血杆菌(HPS)基因工程疫苗,以HPS5型毒株为模板,通过PCR扩增获得副猪嗜血杆菌神经氨酸酶(Neu)全基因,将其克隆至pMD18-T载体并对其进行测定和分析。结果表明,Neu全基因含一个2187bp的开放阅读框,编码一含729个氨基酸的蛋白,与Neu基因参考序列(登录号:NZ-ABKM01000006)的同源性为99.0%。以pMD-Neu基因为模板,重新设计引物,扩增得到HPSNeu蛋白的部分编码区,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建得到重组原核表达质粒pET-Neu。将pET-Neu在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行优化表达,经SDS-PAGE分析,重组蛋白Neu主要以包涵体形式表达,分子质量为52ku;Western-blot分析表明,重组蛋白Neu能与阳性血清发生特异性抗原反应。将纯化重组蛋白Neu试验性注射免疫昆明小鼠,攻毒试验结果显示,氢氧化铝佐剂组的保护性较低,仅有10%;而弗氏佐剂组具有较高的保护性,保护率高达60%。     

高校精神文明建设初探

社会主义精神文明建设重在建设,重在落实,注重养成,务求实效,根据十四届六中全会精神,精神文明建设包括思想道德建设和教育科学文化建设两大内容,据此,本文将从高校工作的实际出发,从青年大学生的特点出发,探讨高校精神文明建设的对策。 一、以正确的理论武装人 突出渗透性 学校以教学为主,学生大部分的时间是在课堂里接受教育,通过教学来提高青年大学生的思想道德素质,这是思想道德教育的主要手段。课堂