仔猪睾丸组织体外培养方法的建立

以30日龄仔猪睾丸组织块为培养对象,应用飞利普TECNAI10电子显微镜对培养前后的生精细胞类别进行了观察,对培养后的组织块进行生精细胞分化程度鉴定,建立了仔猪睾丸组织生精细胞爬片体外培养模型。培养前后电镜观察及HE染色结果显示,培养前细胞种类主要有2种:支持细胞和精原细胞,有少数几个初级精母细胞;培养第20 d的睾丸组织块HE染色观察到3个精子细胞,电镜观察到2个精子细胞。证实,在没有添加睾酮的情况下,此培养体系能够提供睾丸组织块生精细胞分化所需要的条件,使非精子细胞类生精细胞减数分裂为精子细胞。     

不同培养液对牛孤雌生殖胚胎和体细胞核移植胚胎体外发育的影响

采用体外成熟的牛卵母细胞 ,经 5 μmol/LIonomycin 5min和 2mmol/L 6 DMAP 5 μg/mLCCB 4h激活 ,分别在TALP M 199(TM ,1∶2 )、BMOC M 199(BM ,1∶2 )和CR1aa培养液内培养 ,2 4h和 3 6h各组卵母细胞的卵裂率分别为5 6.4%、5 5 .6%、5 3 .6%和 72 .0 %、75 .9%、79.0 % ,无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;培养 8d后囊胚发育率分别为 18.2 %、2 1.4%和 2 9.3 % ,CR1aa内培养孤雌生殖胚的囊胚发育率显著高于TM (P <0 .0 1)。皮肤成纤维细胞构建的重组胚经同法激活后 ,分别在TM、BM和CR1aa内培养 ,2 4h和 3 6hBM和CR1aa内重组胚的卵裂率显著高于TM (4 9.7%、49.8%比 2 0 .5 % ;74.1%、73 .2 %比 5 0 .0 % ) (P <0 .0 1) ;虽然培养 8d后各组胚胎的囊胚发育率无显著差异 ,但CR1aa内重组胚的囊胚发育率稍高 (12 .3 %比 9.8%、11.5 % )。结果表明 ,CR1aa更适合孤雌生殖和体细胞核移植胚胎的体外培养。     

华蟾素配伍丝裂霉素体外抑瘤作用

目的：从体外药敏实验的角度观察华蟾素注射液配伍丝裂霉素对不同肝癌细胞抑瘤效果和对正常肝细胞的毒性反应。方法：通过四甲基偶氮唑盐比色法观察低浓度华蟾素注射液、丝裂霉素及两配伍使用时对人肝癌细胞系SMMC-721、BEL—7402细胞及正常肝细胞系L-02细胞的生长抑制作用。结果：对人肝癌细胞的生长抑制作用，华蟾素及丝裂霉素两配伍使用较两单独使用显增强；丝裂霉素对正常肝细胞具有一定生长抑制作用，而华蟾素注射液则无此作用，与单独使用丝裂霉素比较，两的配伍使用对正常肝细胞的生长抑制作用未见明显增加。结论：华蟾素和丝裂霉素配伍使用可显提高对人肝癌细胞的杀伤作用，同时未增加对正常肝细胞的生长抑制作用，提示华蟾素和丝裂霉素配伍使用在肝癌治疗中具有很好的临床应用前景。     

清宫促孕灌注液对母猪子宫内膜炎的药效试验

明确母猪子宫内膜炎的病原菌,评价清宫促孕灌注液防治母猪子宫内膜炎的药效,为其在临床上推广应用提供依据.方法采用常规方法对母猪子宫内膜炎进行细菌学检查;以液体培养基对倍稀释法测定清宫促孕灌注液及相关单味药对母猪子宫内膜炎主要病原菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并以1.0 g/L高锰酸钾溶液和缩宫素合用作对照,观察清宫促孕灌注液对母猪子宫内膜炎的临床疗效.结果21例患脓性子宫内膜炎母猪子宫中共分离到35株细菌,其中大肠埃希氏菌、葡萄球菌和链球菌分别占31.4%、31.4%和20.0%;其他菌的比例较低.清宫促孕灌注液及相关单味药对母猪子宫内膜炎的主要病原菌均有不同程度的抑制或杀灭作用,其中清宫促孕灌注液和冰片的作用较强,与对照药物桉叶油作用相仿.清宫促孕灌注液对母猪脓性子宫内膜炎的治愈率为96.15%,疗效优于对照药物(P＜0.01).     

伊维菌素聚乳酸微球的研制及其体外释药试验

以生物可降解材料聚乳酸（ＰＬＡ）为载体,用乳化溶剂挥发法制备含伊维菌素（ＩＶＭ）的聚乳酸微球,采用Ｌ１８（３７）正交设计,以微球粒径分布为主要优选指标,筛选出最佳制备条件。所得微球药物包封率高,粒径分布理想,大小适合注射给药;体外释药试验微球无明显突释现象,可缓慢地以接近恒速释药。     

张念慈:西塞山前“鱼大夫”

"西塞山前白鹭飞,桃花流水鳜鱼肥,青箬笠、绿蓑衣,斜风细雨不须归。"唐朝诗人张志和的这首《渔歌子》,描述了湖州近郊西塞山秀丽山水和优良的生态环境。民革党员张念慈工作了40余年的浙江省淡水水产研究所,就座落在这诗画般的西塞山附近。1990年代,他曾经带领团队,连续主持"七五"、"八五"国家科     

金丝桃素体外抗高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒活性的研究

为研究金丝桃素体外对高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)活性的影响,以Marc-145细胞培养增殖的PRRSV为研究对象,通过噻唑蓝(MTT)比色法和观察细胞病变效应(CPE),测定吸光度值(D490nm)和半数细胞感染量(TCID50),以细胞存活率、病毒抑制率和TCID50为指标,评价不同剂量的金丝桃素体外抑制PRRSV活性的效应,并通过改变加药方式(同时、感染前、感染后给药).探讨其抗PRRSV的作用机制.结果表明,在PRRSV感染的同时加入金丝桃素,其细胞存活率和对PRRSV的抑制率略有升高,与PRRSV对照组和拉米夫定对照组相比,均有显著性差异(P<0.01).在PRRSV感染前和感染后加入金丝桃素,其细胞存活率和对PRRSV的抑制率明显升高,且随药物浓度的增加而上升,与PRRSV对照组相比,有显著性差异(P<0.01),与拉米夫定对照组相比无统计学意义(P>0.05).金丝桃素可使PRRSV的TCID50从6.1下降至4.15.证实,金丝桃素具有多环节体外抗PRRSV效应;不同浓度的金丝桃素表现出不同的抗PRRSV活性,并呈现剂量依赖关系.     

自动体外除颤器规范配置的行政公益诉讼探索

探索新领域案件时，检察机关不仅应寻求规范依据，还应进行公共利益的论证，并证明探索新领域案件的必要性。公共场所自动体外除颤器规范配置关乎公共卫生健康，是具有基本性、整体性和发展性的公共利益。检察机关以地方政府规章为主要依据，积极稳妥探索公共卫生健康领域案件，助力法治政府建设，符合人民群众对美好生活的期待，具有必要性和正当性。     

不同生理状态乳牛卵巢卵母细胞基因的差异表达

为了研究不同生理状态下的卵巢卵母细胞基因的表达情况,采集乳牛的卵巢,分离了卵母细胞,以单个卵母细胞的mRNA作为模板,用设计的随机引物和锚定引物,采用一步法RT-PCR扩增了卵母细胞基因.经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,发现有功能黄体和无黄体卵巢卵母细胞基因的电泳条带之间无明显差异,对一条明显差异条带进行回收、纯化,将纯化的PCR产物连接到T栽体,阳性克隆经鉴定后,进行测序和同源性比较.结果显示,与体外培养的牛早期胚胎的一条序列具有很高的同源性.