| 猪圆环病毒2型ORF2截短基因片段真核表达载体的构建及其DNA疫苗的免疫效果 |
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| 引用本文： | 张宁,李茂宁,侯韶毅,兰家暖,谢丽华,黄伟坚,冯励,韦英益,刘芳,李军. 猪圆环病毒2型ORF2截短基因片段真核表达载体的构建及其DNA疫苗的免疫效果[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(4) |
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| 作者姓名： | 张宁 李茂宁 侯韶毅 兰家暖 谢丽华 黄伟坚 冯励 韦英益 刘芳 李军 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005
2. 梧州市动物疫病预防控制中心,广西,梧州,543002 |
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| 基金项目： | 广西科学研究与技术开发计划项目，广西科技基础条件平台建设项目 |
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| 摘 要： | 为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2截短基因片段核酸疫苗的免疫效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,用PCR方法扩增出ORF2基因及其截短基因共8个片段[A(ORF2)、B(51～100 aa)、C(101～150 aa)、D(181～235 aa)、E(151～200 aa)、F(51～150 aa)、G(101～235 aa)、H(51～235 aa)],将其插入pcD-NA3.0栽体中,成功构建了pcDNA-A、pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G、pcDNA-H.将纯化后的真核表达质粒转染PK-15细胞后,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的瞬时表达情况.分别用单独免疫和组合免疫的方法免疫小鼠,每只0.15 mg,用ELISA试剂盒检测小鼠血清中的抗体效价,并分析这两种方法的免疫效果.结果显示,6个片段较短的重组质粒(pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G)转染的细胞中均有明显且较亮的荧光出现,而2个片段较长的重组质粒(pcDNA-A、pcDNA-H)及空载体pcDNA3.0转染的细胞中没有荧光出现.在单独免疫组中,这8个片段的真核表达质粒都能刺激机体产生特异性抗体,其中片段较短的pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E的免疫效果比较理想;在组合免疫中,除pcDNA-C-F外,各个真核表达质粒都能产生较高水平且稳定的抗体,其中pcDNA-D-H、pcDNA-B-F的免疫效果最好.表明组合免疫要比单独免疫的效果好.
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 ORF2截短基因 真核表达 重组质粒 免疫效果 |
Construction of eukaryotic expression vectors with truncated ORF2 gene of porcine circovirus type 2 and observation of immune efficacies |
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| ZHANG Ning,LI Mao-ning,HOU Shao-yi,LAN Jia-nuan,XIE Li-hua,HUANG Wei-jian,FENG Li,WEI Ying-yi,LIU Fang,LI Jun. Construction of eukaryotic expression vectors with truncated ORF2 gene of porcine circovirus type 2 and observation of immune efficacies[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(4) |
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| Authors: | ZHANG Ning LI Mao-ning HOU Shao-yi LAN Jia-nuan XIE Li-hua HUANG Wei-jian FENG Li WEI Ying-yi LIU Fang LI Jun |
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