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| 猪脑心肌炎病毒SYBR Green I real-time PCR检测方法的建立 | |
| 作者姓名： | 施开创 陈进喜 屈素洁 许瑞胜 熊毅 刘棋 陈汉忠 李刚 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100081;广西动物疫病预防控制中心,广西南宁,530001 2. 广西大学动物科学技术学院,广西南宁,530005 3. 广西动物疫病预防控制中心,广西南宁,530001 4. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100081 |
| 基金项目： | 广西自治区科学基金，广西科技创新能力建设基金 |
| 摘 要： | 针对猪脑心肌炎病毒(EMCV)VP1基因序列设计并合成了l对引物,以构建的含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测EMCV核酸的SYBR Green I real-time PCR方法.检测结果显示,该方法线性关系好,标准曲线的相关系数达到0.991;对初始模板的检出下限为1×101copies/μL,比常规PCR方法高100倍;与其他猪源病毒,如口蹄疫病毒(FMDV)、猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)均不发生交叉反应;组内与组间的变异系数均小于3%.应用建立的方法检测了17份临床可疑病例的心、脑组织样本,结果1份为阳性.表明,建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于EMCV的病原检测及定量分析. |
| 关 键 词： | 脑心肌炎病毒 猪 荧光定量PCR |
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