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羊传染性脓疱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:李超,赵魁,赵权,贺文琦,宋德光,李晶,解胜男,陈克研,高丰. 羊传染性脓疱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(3)
作者姓名:李超  赵魁  赵权  贺文琦  宋德光  李晶  解胜男  陈克研  高丰
作者单位:李超,赵权(吉林农业大学,动物科技学院,吉林,长春,130118);赵魁,贺文琦,宋德光,解胜男,陈克研,高丰(吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062);李晶(吉林正业生物制品有限责任公司,吉林,吉林,132000) 
基金项目:吉林省科技发展计划重点资助项目 
摘    要:针对羊传染性脓疱病毒(ORFV)B2L基因序列设计合成了1对引物,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测ORFV核酸的SYBRGreenⅠreal-timePCR方法。结果显示,该方法线性关系良好,标准曲线的相关系数为0.999;检测灵敏度可达9.4×104copies/μL;与绵羊痘病毒(SPV)不发生交叉反应,具有良好的特异性;组内Ct值相同,组间变异系数小于2%。应用建立的方法检测20份疑似羊传染性脓疱病病料,结果17份为阳性,同时用常规PCR进行检测,结果仅10份为阳性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可初步用于ORFV的检测。

关 键 词:羊传染性脓疱病毒  Green Ⅰ实时荧光定量聚合酶链反应  标准曲线  SYBR Green Ⅰ real-time PCR

Development of a SYBR GreenI real-time PCR assay for detection of orf virus
LI Chao,ZHAO Kui,ZHAO Quan,HE Wen-qi,SONG De-guang,LI Jing,XIE Sheng-nan,CHEN Ke-yan,GAO Feng. Development of a SYBR GreenI real-time PCR assay for detection of orf virus[J]. Chinese Veterinary Science, 2010, 40(3)
Authors:LI Chao  ZHAO Kui  ZHAO Quan  HE Wen-qi  SONG De-guang  LI Jing  XIE Sheng-nan  CHEN Ke-yan  GAO Feng
Affiliation:LI Chao1,ZHAO Kui2,ZHAO Quan1,HE Wen-qi2,SONG De-guang2,LI Jing3,XIE Sheng-nan2,CHEN Ke-yan2,GAO Feng2(1.College of Animal Science , Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China,2.College of Animal Science , Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun 130062,3.Jilin Zhengye Biotechnology Co.,Ltd.,Jilin 132000,China)
Abstract:
Keywords:SYBR  orf virus  standard curve
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