| 旋毛虫TsP53抗原基因的原核表达及抗原性分析 |
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| 引用本文： | 王鸿盛,李文卉,盖文燕,姚菊霞,曲自刚,王艳华,张德林,薛慧文,付宝权. 旋毛虫TsP53抗原基因的原核表达及抗原性分析[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(4) |
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| 作者姓名： | 王鸿盛 李文卉 盖文燕 姚菊霞 曲自刚 王艳华 张德林 薛慧文 付宝权 |
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| 作者单位： | 王鸿盛,WANG Hong-sheng(甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州,730070;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州,730046);李文卉,盖文燕,姚菊霞,曲自刚,王艳华,张德林,付宝权,LI Wen-hui,GE Wen-yan,YAO Ju-xia,QU Zi-Gang,WANG Yan-hua,ZHANG De-lin,FU Bao-quan(中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州,730046);薛慧文,XUE Hui-wen(甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州,730070) |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划，中央级公益性科研院所基本科研业务费专项，甘肃省科技重大专项，教育部留学回国人员科研启动基金资助项目 |
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| 摘 要： | 应用RT-PCR方法从旋毛虫肌幼虫总RNA中获得TsP53基因片段,限制性酶切后连接到表达质粒pET30a中,转化大肠杆菌DH5α。筛选阳性克隆,经限制性酶切、PCR分析及测序鉴定后,将重组表达质粒pET30a-TsP53转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物,对表达产物纯化后通过间接ELISA鉴定重组蛋白的抗原性。结果显示,成功构建了重组表达质粒pET30a-TsP53,测序结果表明插入片段为1 176 bp,编码391个氨基酸残基,与旋毛虫P53抗原基因序列(U25127)有99%的同源性,开放阅读框正确。含有pET30a-TsP53重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物分子质量约为50 ku,主要以包涵体形式存在。间接ELISA结果表明,重组抗原可以被旋毛虫感染不同时期的猪血清特异性识别,有望用于旋毛虫病的免疫诊断。
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| 关 键 词： | 旋毛虫 原核表达 抗原性 |
Prokaryotic expression and antigenicity analysis of TsP53 gene of Trichinella spiralis |
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| WANG Hong-sheng,,LI Wen-hui,GE Wen-yan,YAO Ju-xia,QU Zi-Gang,WANG Yan-hua,ZHANG De-lin,XUE Hui-wen,FU Bao-quan. Prokaryotic expression and antigenicity analysis of TsP53 gene of Trichinella spiralis[J]. Chinese Veterinary Science, 2010, 40(4) |
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| Authors: | WANG Hong-sheng LI Wen-hui GE Wen-yan YAO Ju-xia QU Zi-Gang WANG Yan-hua ZHANG De-lin XUE Hui-wen FU Bao-quan |
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| Affiliation: | WANG Hong-sheng1,2,LI Wen-hui2,GE Wen-yan2,YAO Ju-xia2,QU Zi-Gang2,WANG Yan-hua2,ZHANG De-lin2,XUE Hui-wen1,FU Bao-quan2(1.College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China,2.Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province/Key Laboratory of Veterinary Public Health of the Ministry of Agriculture/State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TsP53 Trichinella spiralis TsP53 prokaryotic expression antigenicity |
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