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PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的小鼠免疫试验
引用本文:许信刚,张宽,王志昇,童德文. PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的小鼠免疫试验[J]. 中国兽医科学, 2011, 0(1)
作者姓名:许信刚  张宽  王志昇  童德文
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;西北农林科技大学动物医学院;
基金项目:家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题(SKLVEB2009KFKT002); 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-07-0701)
摘    要:为了研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病双价基因工程亚单位疫苗,利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF3-ORF2,并对该重组病毒进行Western-blot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验、血清中和试验以及淋巴细胞增殖试验。结果显示,重组杆状病毒表达了重组GP3蛋白和Cap蛋白;该重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf-9后在细胞膜上展示了重组GP3蛋白和Cap蛋白,并且重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。动物免疫试验表明,重组杆状病毒免疫小鼠产生了抗PRRSV和抗PCV-2的特异性抗体,免疫小鼠血清中抗PRRSV和抗PCV-2的中和抗体效价分别达到1∶9.6和1∶13.6。淋巴细胞增殖试验表明,该重组杆状病毒能诱发较强的细胞免疫应答。结果表明,表面展示PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白的重组杆状病毒已构建成功,这为下一步应用该重组杆状病毒作为双价亚单位疫苗预防PRRSV和PCV-2的共感染奠定了基础。

关 键 词:杆状病毒表面展示系统  猪繁殖与呼吸综合征病毒  猪圆环病毒2型  GP3蛋白  Cap蛋白  

Baculovirus surface display of GP3 envelope glycoprotein of PRRSV and Cap protein of PCV-2 and immunogenicity of the displayed proteins in mouse model
XU Xin-gang,,ZHANG Kuan,WANG Zhi-sheng,TONG De-wen. Baculovirus surface display of GP3 envelope glycoprotein of PRRSV and Cap protein of PCV-2 and immunogenicity of the displayed proteins in mouse model[J]. Chinese Veterinary Science, 2011, 0(1)
Authors:XU Xin-gang    ZHANG Kuan  WANG Zhi-sheng  TONG De-wen
Affiliation:XU Xin-gang1,2,ZHANG Kuan2,WANG Zhi-sheng2,TONG De-wen2(1.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China,2.College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling 712100,China)
Abstract:In order to develope divalent genetic engineering subunit vaccines against both porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS) and post-weaning multisystemic wasting syndrome(PMWS) based on baculovirus surface display system,one recombinant baculovirus BacSC-Dual-ORF3-ORF2 expressing both histidine-tagged PRRSV GP3 protein and porcine circovirus type 2(PCV-2) Cap protein with the CTD and TM derived from baculovirus envelope protein gp64 was constructed.The recombinant baculovirus was analyzed by Wester...
Keywords:baculovirus surface display  PRRSV  PCV-2  GP3 protein  Cap protein  
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