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布鲁氏菌bp26基因缺失株的构建
引用本文:潘文,王佳莹,赵明秋,琚春梅,易琳,常艳,虞红娇,陈金顶. 布鲁氏菌bp26基因缺失株的构建[J]. 中国兽医科学, 2011, 0(3)
作者姓名:潘文  王佳莹  赵明秋  琚春梅  易琳  常艳  虞红娇  陈金顶
作者单位:华南农业大学兽医学院;
基金项目:广东省动植物防疫检疫研究专项(粤财农[2009]225); 国家自然科学基金-广东省自然科学基金联合项目(U0631006); 教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目(IRT0723); 广东省自然科学基金创新团队项目(5200638)
摘    要:选择含有反向筛选基因sacB标记的pRE112质粒为自杀载体,利用等位基因交换的方法成功敲除了布鲁氏菌弱毒疫苗S19株、S2株、M5株的bp26基因,构建了具有非抗性基因标记的缺失株S19-Δbp26、S2-Δbp26、M5-Δbp26。将构建的重组自杀质粒pRE-Δbp26(缺失了bp26基因的681个碱基)电转化入布鲁氏菌后,经过5μg/mL氯霉素筛选单交换子和70g/L蔗糖筛选同源重组双交换子,用菌落PCR及DNA测序的方法进行验证。结果表明,bp26基因的缺失改造成功,连续传20代后菌落PCR及DNA测序的结果显示突变株具有遗传稳定性。以pRE112自杀质粒为基础构建无抗性基因标记的布鲁氏菌缺失株为布鲁氏菌的基因功能研究奠定了基础,同时Δbp26缺失株的构建可为新型布鲁氏菌疫苗的研制奠定基础。

关 键 词:布鲁氏菌  bp26基因  自杀质粒  基因缺失株  

Construction of unmarked bp26 gene-deleted strains of Brucella spp.
PAN Wen,WANG Jia-ying,ZHAO Ming-qiu,JU Chun-mei,YI Lin,CHANG Yan,YU Hong-jiao,CHEN Jin-ding. Construction of unmarked bp26 gene-deleted strains of Brucella spp.[J]. Chinese Veterinary Science, 2011, 0(3)
Authors:PAN Wen  WANG Jia-ying  ZHAO Ming-qiu  JU Chun-mei  YI Lin  CHANG Yan  YU Hong-jiao  CHEN Jin-ding
Affiliation:PAN Wen,WANG Jia-ying,ZHAO Ming-qiu,JU Chun-mei,YI Lin,CHANG Yan,YU Hong-jiao,CHEN Jin-ding(College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)
Abstract:
Keywords:Brucella  bp26 gene  suicide plasmid  gene deletion strain  
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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