| 水牛cMyc基因与穿膜肽TAT的融合表达 |
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| 引用本文： | 刘庆友,伏彭辉,刘金凤,邓彦飞,蒋如明,石德顺. 水牛cMyc基因与穿膜肽TAT的融合表达[J]. 中国兽医科学, 2011, 0(1) |
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| 作者姓名： | 刘庆友 伏彭辉 刘金凤 邓彦飞 蒋如明 石德顺 |
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| 作者单位： | 广西大学动物科技学院;西南大学荣昌校区; |
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| 基金项目： | 农业部重大专项(2008ZX08007-003); 国家自然科学基金资助项目(30960251); 国家博士后基金项目 |
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| 摘 要： | 为探讨干细胞转录因子与穿膜肽融合表达蛋白对水牛体细胞诱导重编程的可行性,作者对影响水牛cMyc基因穿膜肽融合蛋白表达的因素进行了探索。应用双酶切定向克隆的方法,将水牛cMyc基因CDS(1 350bp)连接到pET-HA2-TAT载体中,构建成pET-cMyc-TAT载体,经酶切、PCR和测序验证,载体构建正确。将pET-cMyc-TAT载体转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导目的蛋白表达,同时探索了其表达形式、诱导表达IPTG最优浓度和最优时间以及蛋白纯化咪唑洗脱的最佳浓度。结果表明,融合蛋白cMyc-TAT在37℃以包涵体的形式大量表达,IPTG终浓度0.001mmol/L,诱导5h为最佳诱导条件,纯化蛋白最佳咪唑洗脱浓度为145.76mmol/L,纯化蛋白经过Western-blot验证具有抗原性。研究结果为建立转录因子穿膜肽融合蛋白诱导水牛iPS细胞技术体系奠定了基础。
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| 关 键 词： | 水牛 cMyc基因 TAT 融合表达 |
Fusion expression of buffalo cMyc gene with cell-penetrating peptide TAT |
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| LIU Qing-you,FU Peng-hui,,LIU Jin-feng,DENG Yan-fei,JIANG Ru-ming,SHI De-shun. Fusion expression of buffalo cMyc gene with cell-penetrating peptide TAT[J]. Chinese Veterinary Science, 2011, 0(1) |
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| Authors: | LIU Qing-you FU Peng-hui LIU Jin-feng DENG Yan-fei JIANG Ru-ming SHI De-shun |
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| Affiliation: | LIU Qing-you1,FU Peng-hui1,2,LIU Jin-feng1,DENG Yan-fei1,JIANG Ru-ming1,SHI De-shun1(1.College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530004,China,2.Rongchang Campus,Southwestern University,Rongchang 402460,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | buffalo cMyc gene TAT fusion expression |
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