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鸡传染性支气管炎病毒real-time PCR检测方法的建立
引用本文:磨美兰,陈秋英,侯金莲,范文胜,李孟,韦平,韦天超. 鸡传染性支气管炎病毒real-time PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2011, 0(2)
作者姓名:磨美兰  陈秋英  侯金莲  范文胜  李孟  韦平  韦天超
作者单位:广西大学动物科学技术学院;
基金项目:国家自然科学基金项目(30700599); 广西自然科学基金项目(桂科自0991044); 广西科技攻关项目(0993009-2); 广西大学拔尖创新团队建设计划项目
摘    要:针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因片段设计并合成了1对引物,将构建的重组质粒作为阳性标准品,成功建立了检测IBV核酸的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法。结果显示,该方法的线性关系好,标准曲线的相关系数达0.998 3;最低可以检测到1×101 copies/μL的核酸模板;与常见禽源病毒新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒、马立克氏病病毒均不发生交叉反应,重复性试验的变异系数小于3%。应用建立的方法对人工感染IBV的20只试验鸡的40份气管和肾样品中的病毒核酸进行检测,结果显示,攻毒后第5和第7天肾中病毒含量高于气管,证实了临床表现与病毒载量之间的关系。结果表明,建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于IBV的病原检测及定量分析。

关 键 词:传染性支气管炎病毒  实时荧光定量聚合酶链反应  SYBR Green Ⅰ  

Development of a real-time PCR assay for detection of infectious bronchitis virus
MO Mei-lan,CHEN Qiu-ying,HOU Jin-lian,FAN Wen-sheng,LI Meng,WEI Ping,WEI Tian-chao. Development of a real-time PCR assay for detection of infectious bronchitis virus[J]. Chinese Veterinary Science, 2011, 0(2)
Authors:MO Mei-lan  CHEN Qiu-ying  HOU Jin-lian  FAN Wen-sheng  LI Meng  WEI Ping  WEI Tian-chao
Affiliation:MO Mei-lan,CHEN Qiu-ying,HOU Jin-lian,FAN Wen-sheng,LI Meng,WEI Ping,WEI Tian-chao(College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China)
Abstract:
Keywords:
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