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口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达
引用本文:魏衍全,田宏,吴锦艳,陈妍,尚佑军,窦永喜,刘湘涛,才学鹏. 口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达[J]. 中国兽医科学, 2011, 0(5)
作者姓名:魏衍全  田宏  吴锦艳  陈妍  尚佑军  窦永喜  刘湘涛  才学鹏
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A03); 转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-010B)
摘    要:为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与EGFP共表达质粒并在PK-15细胞中获得了表达。

关 键 词:口蹄疫病毒  3C基因  增强型绿色荧光蛋白  真核共表达  

Co-expression of 3C gene of foot-and-mouth disease virus and enhanced green fluorescent protein gene in Eukaryote
WEI Yan-quan,TIAN Hong,WU Jin-yan,CHEN Yan,SHANG You-jun,DOU Yong-xi,LIU Xiang-tao,CAI Xue-peng. Co-expression of 3C gene of foot-and-mouth disease virus and enhanced green fluorescent protein gene in Eukaryote[J]. Chinese Veterinary Science, 2011, 0(5)
Authors:WEI Yan-quan  TIAN Hong  WU Jin-yan  CHEN Yan  SHANG You-jun  DOU Yong-xi  LIU Xiang-tao  CAI Xue-peng
Affiliation:WEI Yan-quan,TIAN Hong,WU Jin-yan,CHEN Yan,SHANG You-jun,DOU Yong-xi,LIU Xiang-tao,CAI Xue-peng(State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/National Foot-and-Mouth Disease Reference Laboratory/Key Laboratory of Animal Virology of the Ministry of Agriculture/Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China)
Abstract:
Keywords:foot-and-mouth disease virus  3C gene  enhanced green fluorescent protein(EGFP)  eukar-yotic co-expression  
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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