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马流感病毒NP单克隆抗体的制备及特性鉴定
引用本文:姬媛媛,郭巍,王征,赵立平,李红梅,相文华.马流感病毒NP单克隆抗体的制备及特性鉴定[J].中国兽医科学,2011(6).
作者姓名:姬媛媛  郭巍  王征  赵立平  李红梅  相文华
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室;东北农业大学生命科学学院;
基金项目:黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD200812)
摘    要:利用原核表达的马流感病毒(EIV)核蛋白(NP)为免疫原,经腹腔接种4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经4次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得了3株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株2G11、3E10和4A1,并对它们进行了亚类鉴定、间接ELISA检测和特性鉴定。结果显示,单抗2G11为IgG1亚型,3E10为IgG2a亚型,4A1为IgM亚型,轻链均为κ链。单抗2G11、3E10和4A1的细胞上清液及腹水效价分别为1∶640、1∶640、1∶320和1∶409 600、1∶204 800、0。这3株单抗均能特异性识别EIV NP重组蛋白,并且能够与天然EIV结合;获得的3株单抗与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马乙型脑炎病毒均不发生交叉反应。亲和力试验结果显示,单抗2G11和3E10与EIV的亲和力常数分别为4.39×106 M-1和2.20×106 M-1。

关 键 词:马流感病毒  核蛋白  单克隆抗体  特性鉴定  

Preparation and identification of monoclonal antibodies against NP of equine influenza virus
JI Yuan-yuan,GUO Wei,WANG Zheng,ZHAO Li-ping,LI Hong-mei,XIANG Wen-hua.Preparation and identification of monoclonal antibodies against NP of equine influenza virus[J].Veterinary Science in China,2011(6).
Authors:JI Yuan-yuan  GUO Wei  WANG Zheng  ZHAO Li-ping  LI Hong-mei  XIANG Wen-hua
Institution:JI Yuan-yuan1,GUO Wei1,WANG Zheng2,ZHAO Li-ping1,LI Hong-mei1,XIANG Wen-hua1(1.State Key Laboratory Veterinary Biotechnology/Division of Livestock Infectious Diseases,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China,2.College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)
Abstract:
Keywords:equine influenza virus  nucleoprotein  monoclonal antibody  characterization identification  
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