| 副鸡嗜血杆菌基因文库的构建与筛选 |
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| 引用本文： | 王雪敏,梁玉荣,吕学泽,张培君,龚玉梅,王宏俊.副鸡嗜血杆菌基因文库的构建与筛选[J].中国兽医科学,2012(4):368-372. |
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| 作者姓名： | 王雪敏 梁玉荣 吕学泽 张培君 龚玉梅 王宏俊 |
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| 作者单位： | 河北工程大学农学院;北京市农林科学院畜牧兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家“十二五”高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A210);北京市自然科学基金资助项目(6102009);北京市优秀人才培养资助项目(2010D002020000009) |
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| 摘 要： | 为了筛选副鸡嗜血杆菌的体内表达基因,提取了副鸡嗜血杆菌的全基因组,构建了副鸡嗜血杆菌基因组的pET系统表达文库。运用PCR及核酸内切酶(SalⅠ+NdeⅠ)鉴定基因文库,并以病原菌吸附后的康复血清作为探针,采用菌落原位杂交的方法对基因文库进行筛选。结果显示,重组质粒中有0.5～2kb的片段插入,99%的基因包含在基因文库中;重复筛选后得到的阳性克隆再经过PCR与SalⅠ+NdeⅠ酶切鉴定后定向测序,并对测序结果在NCBI上进行分析后发现筛选获得的基因中,有1个表达为转运谷氨酰还原酶、1个表达为转录终止因子,1个表达为荚膜合成域2,还有2个表达为保守假想蛋白。结果表明,本研究应用体内诱导抗原技术(IVIAT)筛选到了一些副鸡嗜血杆菌体内诱导表达基因,并对基因的功能做了初步探讨,在找寻副鸡嗜血杆菌在体内生存以及致病关键基因的道路上前进了一步,为传染性鼻炎的预防和治疗积累了有价值的资料。
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| 关 键 词： | 副鸡嗜血杆菌 基因文库构建 基因文库筛选 菌落原位杂交 |
Construction and screening of genomic library of Haemophilus paragallinarum |
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| WANG Xue-min,LIANG Yu-rong,Lü Xue-ze,ZHANG Pei-jun,GONG Yu-mei,WANG Hong-jun.Construction and screening of genomic library of Haemophilus paragallinarum[J].Veterinary Science in China,2012(4):368-372. |
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| Authors: | WANG Xue-min LIANG Yu-rong Lü Xue-ze ZHANG Pei-jun GONG Yu-mei WANG Hong-jun |
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| Institution: | 1.College of Agriculture,Hebei University of Engineering,Handan 056021,China;2.Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Beijing Academy of Agricultural and Forestry Sciences,Beijing 100097,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Haemophilus paragallinarum genomic library construction genomic library screening colony hybridization |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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