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基于TaqMan探针的猪圆环病毒1型实时荧光定量 PCR检测方法的建立
引用本文:张福良,宋长绪,朱道中,徐维加. 基于TaqMan探针的猪圆环病毒1型实时荧光定量 PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2007, 37(6): 477-481
作者姓名:张福良  宋长绪  朱道中  徐维加
作者单位:1. 安阳工学院,河南,安阳,455000;广东省农业科学院,兽医研究所,广东,广州,510640
2. 广东省农业科学院,兽医研究所,广东,广州,510640
3. 广州出入境检验检疫局,广东,广州,510623
4. 云南出入境检验检疫局,云南,昆明,650228
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:采用PCR方法克隆了猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因,构建了重组质粒pMD-ORF2并将其作为标准阳性模板.通过对反应条件进行优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF2为标准品进行荧光定量PCR扩增,建立了检测PCV1的荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的检测灵敏度可达1.0×101拷贝/μL;对起始浓度为1.0×107、1.0×106、1.0×105拷贝/μL标准品的最终实际测得值分别为1.001×107、0.869×106和0.988×105拷贝/μL,变异系数分别为4.758%、1.865%和3.836%.表明,此方法具有良好的准确性和重现性.

关 键 词:猪圆环病毒1型  实时荧光定量PCR  TaqMan探针
文章编号:1673-4696(2007)06-0477-05
修稿时间:2007-01-22

Development of real-time fluorescent quantitative PCR assay-based on TaqMan probe for detection of porcine circovirus serotype 1
ZHANG Fu-liang,SONG Chang-xu,ZHU Dao-zhong,XU Wei-jia. Development of real-time fluorescent quantitative PCR assay-based on TaqMan probe for detection of porcine circovirus serotype 1[J]. Chinese Veterinary Science, 2007, 37(6): 477-481
Authors:ZHANG Fu-liang  SONG Chang-xu  ZHU Dao-zhong  XU Wei-jia
Abstract:
Keywords:porcine circovirus serotype 1  real-time fluorescent quantitative PCR  TaqMan probe
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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