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| 猪瘟病毒E2基因主要抗原区原核表达载体的构建及表达 | |
| 引用本文： | 胡慧,邱昌庆,张彦明.猪瘟病毒E2基因主要抗原区原核表达载体的构建及表达[J].中国兽医科学,2004,34(1):3-7. |
| 作者姓名： | 胡慧 邱昌庆 张彦明 |
| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;中国农业科学院,兰州兽医研究所,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046 2. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046 3. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100 |
| 基金项目： | 社会公益研究专项资金资助项目 (2 0 0 1DIA10 0 0 6 ) |
| 摘 要： | 用RT PCR技术对猪瘟兔化弱毒C株、石门强毒株 (Shimen)、近期地方流行的属于第 1群毒株的新疆毒株 (XJ)和第 2群代表毒株甘肃临洮 (LT)株E2基因的主要抗原区进行扩增 ,均得到约 5 6 1bp的基因片段 ;经克隆测序及序列分析 ,该基因编码 187个氨基酸残基 ,预计蛋白分子质量为 2 1.7ku。将这 4个基因分别克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中 ,阅读框是正确的 ,从而构建成重组表达载体。重组质粒转化至宿主菌BL2 1(DE3)中 ,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG )进行诱导表达 ,对表达的蛋白用SDS PAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明 ,E2基因的主要抗原区可以在大肠埃希氏菌中表达 ,表达的蛋白多以包涵体形式存在 ,表达产物的分子质量约为 5 0 .0ku ,与理论推测的分子质量一致 ;薄层凝胶扫描分析表明 ,表达蛋白约占菌体蛋白总量的 2 0 .1% ;免疫印迹结果证明 ,表达的E2蛋白可被猪瘟阳性血清所识别。 |
| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E2基因 表达载体构建 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2004)01-0003-05 |
| 修稿时间： | 2003年9月30日 |
Expression vector construction and prokaryotic expression of the main antigen domains of classical swine fever virus E2 gene |
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| HU Hui.Expression vector construction and prokaryotic expression of the main antigen domains of classical swine fever virus E2 gene[J].Veterinary Science in China,2004,34(1):3-7. | |
| Authors: | HU Hui |
| Abstract: | |
| Keywords: | CSFV E2 gene prokaryotic expression construction of expression vector |
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