| 基于重组E2蛋白的猪瘟病毒抗体间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 孙元,夏照和,梁冰冰,彭伍平,仇华吉. 基于重组E2蛋白的猪瘟病毒抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(4): 315-319 |
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| 作者姓名： | 孙元 夏照和 梁冰冰 彭伍平 仇华吉 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划 , 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 根据昆虫细胞密码子偏嗜性,对猪瘟病毒E2基因进行密码子优化,并利用昆虫杆状病毒表达系统进行了表达,表达水平约为野生型E2基因的3倍.将表达的重组E2蛋白纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组E2蛋白的问接ELISA方法,并对此方法的反应条件进行了优化.确定的ELISA最佳条件为抗原包被浓度为2 μg/mL,封闭液为10 g/L聚乙烯醇PBS溶液,被检血清1∶160稀释,辣根过氧化物酶标记的兔抗猪IgG(二抗)1∶5 000稀释.确定的阴性血清临界D450 nm值为0.30,阳性血清临界D450 nm值为0.35.将该ELISA方法与IDEXX公司生产的猪瘟病毒抗体检测试剂盒做相关比较,结果符合率为82.3%.表明,该方法可以用于猪瘟病毒抗体的检测.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E2蛋白 密码子优化 杆状病毒表达系统 间接ELISA 重组 蛋白 猪瘟 病毒 抗体 indirect ELISA 检测方法 classical swine fever virus antibodies detecting baculovirus protein recombinant based 符合率 结果 相关比较 检测试剂盒 生产 阳性血清 |
| 文章编号： | 1673-4696(2008)04-0315-05 |
| 修稿时间： | 2007-11-16 |
Development of an indirect ELISA based on the recombinant E2 protein expressed in baculovirus for detecting antibodies against classical swine fever virus |
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| SUN Yuan,XIA Zhao-he,LIANG Bing-bing,PENG Wu-ping,QIU Hua-ji. Development of an indirect ELISA based on the recombinant E2 protein expressed in baculovirus for detecting antibodies against classical swine fever virus[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(4): 315-319 |
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| Authors: | SUN Yuan XIA Zhao-he LIANG Bing-bing PENG Wu-ping QIU Hua-ji |
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