| 鸡IL-1β和IL-2及IL-6基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
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| 作者姓名： | 刘丽达 倪学勤 曾东 魏豪 李洁萍 |
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| 作者单位： | 刘丽达,魏豪,李洁萍(四川农业大学,动物医学院,动物微生态研究中心,四川,雅安,625014);倪学勤,曾东(四川农业大学,动物医学院,动物微生态研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014) |
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| 基金项目： | 教育部"长江学者和创新团队发展计划"项目，四川省科技厅国际合作项目 |
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| 摘 要： | 为了建立检测鸡IL-1β、IL-2及IL-6基因的荧光定量PCR方法,根据GenBank上IL-1β、IL-2、IL-6的基因序列,在保守区设计并合成了各自的特异引物,选择β-actin和GAPDH基因为内参,采用SYBRGreen Ⅰ染料法,以常规PCR产物为标准品,建立标准曲线,并进行熔解曲线分析.结果显示,各基因标准曲线的C_1值检测范围在12～33左右,具有良好的线性关系,r~2均大于0.990.熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰.结果表明,建立的鸡IL-1β、IL-2及IL-6基因实时荧光定量RT-PCR方法灵敏度高、特异性强、检测周期短,为从mRNA水平对鸡IL进行定量分析奠定了基础.
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| 关 键 词： | IL-1β 实时荧光定量聚合酶链式反应 鸡 IL-1β |
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