| 小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 刘玉洪,花群义,徐自忠,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲,许靖逸,高洪.小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达[J].中国兽医科学,2006,36(9):692-695. |
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| 作者姓名： | 刘玉洪 花群义 徐自忠 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 许靖逸 高洪 |
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| 作者单位： | 1. 云南农业大学,云南,昆明,650201
2. 云南出入境检验检疫局,技术中心,云南,昆明,650228 |
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| 摘 要： | 参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRV H基因,将其克隆至pUC18-T质粒中,转化E.coliJM109感受态细胞,构建并选择PPRV H基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正确,将其克隆至pBAD/Thio-TOPO载体中,转化E.coliTOP10感受态细胞,核苷酸序列分析证实,成功构建了PPRV H基因重组表达载体。经不同浓度L-阿拉伯糖诱导,可稳定、高效地表达PPRV H抗原。SDS-PAGE分析结果表明,用终浓度为0.2 g/L的L-阿拉伯糖诱导5 h的表达量最高,表达蛋白为分子质量约83 ku的融合蛋白;经薄层扫描分析,其表达产量约占菌体总蛋白的10%。Western-blotting检测表明,诱导的蛋白能与PPRV H蛋白单抗发生特异性反应,说明表达的融合蛋白中含有PPRV H糖蛋白抗原。
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 H糖蛋白基因 表达 |
| 文章编号： | 1673-4696(2006)09-0692-04 |
| 修稿时间： | 2006年4月17日 |
Construction of prokaryotic vector and expression of H glycoprotein gene of peste des petits ruminants virus |
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| LIU Yu-hong,HUA Qun-yi,XU Zi-zhong,YANG Yun-qing,ZHOU Xiao-li,DONG-Jun,YIN Shang-lian,XU Jing-yi,GAO Hong.Construction of prokaryotic vector and expression of H glycoprotein gene of peste des petits ruminants virus[J].Veterinary Science in China,2006,36(9):692-695. |
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| Authors: | LIU Yu-hong HUA Qun-yi XU Zi-zhong YANG Yun-qing ZHOU Xiao-li DONG-Jun YIN Shang-lian XU Jing-yi GAO Hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | peste des petits ruminants virus(PPRV) H glycoprotein gene expression |
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