| 猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 黄小波,李娜,文心田,曹三杰,余慧,杨恒,秦学远,尹杰. 猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(11) |
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| 作者姓名： | 黄小波 李娜 文心田 曹三杰 余慧 杨恒 秦学远 尹杰 |
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| 作者单位： | 黄小波,文心田,曹三杰,余慧,杨恒,尹杰(四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,四川省动物疫病与人类健康重点实验室,四川,雅安,625014);李娜(四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,四川省动物疫病与人类健康重点实验室,四川,雅安,625014;西南交通大学,机械工程学院,四川,成都,610000);秦学远(四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,四川省动物疫病与人类健康重点实验室,四川,雅安,625014;四川省动物疫病顸防控制中心,四川,成都,610000) |
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| 基金项目： | 教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目，四川省教育厅资助项目 |
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| 摘 要： | 以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA法对融合细胞进行筛选,采用有限稀释法对阳性细胞进行4次亚克隆,获得了3株能稳定分泌N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为JY(4)-1、JY(4)-2、JY(4)-3.分别采用体外培养法、诱导腹水法和实体瘤法制备单克隆抗体,并用间接ELISA法检测其效价,结果显示,这3株杂交瘤细胞的细胞培养上清、小鼠腹水和血清的单抗效价均分别为1:512、1:10~5、1:10~5,其中以诱导腹水法制备的单抗产量和效价最佳.间接免疫荧光试验结果显示,这3株单抗均能与TGEV感染的ST细胞产生特异性免疫荧光,而不与猪细小病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒等发生交叉反应;经鉴定,3株单抗的亚类均为IgG2a,这3株杂交瘤细胞具有良好的遗传稳定性.
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| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 重组N蛋白 单克隆抗体 杂交瘤 |
Development and identification of monoclonal antibodies against recombinant nucleoprotein of transmissible gastroenteritis virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | transmissible gastroenteritis virus recombinant N protein monocional antibody hybridoma |
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