| 基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立 |
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| 作者姓名： | 刘涛 杜丽 王凤阳 雷明 崔克 成鹰 陈品林 王轶 林杰材 满初日嘎 |
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| 作者单位： | 1. 海南大学,农学院,海口市动物基因工程重点实验室,海南,海口,570228
2. 海南省动物疫病预防控制中心,海南,海口,570203 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部留学回国人员科研启动基金，海南省教育厅高等学校科研项目 |
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| 摘 要： | 为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法.结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性.用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%.表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测.
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| 关 键 词： | 猪戊型肝炎病毒 原核表达 间接酶联免疫吸附试验 |
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