| 马麝朊蛋白基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 王辉太,吴润,张小丽,姜中毅,陈豪泰. 马麝朊蛋白基因的克隆与原核表达[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(12) |
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| 作者姓名： | 王辉太 吴润 张小丽 姜中毅 陈豪泰 |
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| 作者单位： | 王辉太(兰州动物园,甘肃,兰州,730000);吴润,张小丽,姜中毅(甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070);陈豪泰(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046) |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金项目，家畜疫病病原生物学国家重点实验室基金项目 |
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| 摘 要： | 为了解马麝朊蛋白基因的结构特征和其细胞型朊蛋白的性质,应用分子克隆和DNA重组技术进行了马麝朊蛋白基因的克隆、序列分析及其原核表达.序列分析表明,马麝朊蛋白基因编码区是包含在单一外显子内的完整开放阅读框,全长为771 bp,与马鹿、白尾鹿以及乳牛和绵羊朊蛋白基因相比,核苷酸序列和推导氨基酸序列的同源性分别为97.3%～98.1%和97.7%～98.8%,说明朊蛋白基因在同科和不同科的反刍动物间是保守的;成功构建了马麝重组朊蛋白(85～233 aa)原核表达栽体pGEX-MuPrP(85～233),并转化E.coli BL21(DE3),获得重组表达菌E.coli GST-MuPrP(85～233),该重组菌可产生预期大小约为42.4ku的融合蛋白GST-MuPrP(85～233),在优化表达条件下,可产生占细菌总蛋白量30%以上的融合蛋白,免疫印迹检测显示表达蛋白可与抗牛单克隆抗体4C11反应,表明该基因的各氨基酸突变并未影响其单抗4C11的识别表位.
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| 关 键 词： | 马麝 朊蛋白基因 克隆 重组朊蛋白 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of Moschus sifanicus prion protein gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Moschus sifanicus(musk deer) prion protein gene cloning recombinant prion protein prokaryotic expression |
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