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乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备
引用本文:华荣虹,王斌,陈娜莎,于海,刘天强,马红,刘娣,童光志. 乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(2): 133-136
作者姓名:华荣虹  王斌  陈娜莎  于海  刘天强  马红  刘娣  童光志
作者单位:1. 东北林业大学,博士后流动站,黑龙江,哈尔滨,150086;黑龙江省农业科学院,畜牧研究中心博士后工作站,黑龙江,哈尔滨,150086;中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 黑龙江省农业科学院,畜牧研究中心博士后工作站,黑龙江,哈尔滨,150086
4. 东北林业大学,博士后流动站,黑龙江,哈尔滨,150086;黑龙江省农业科学院,畜牧研究中心博士后工作站,黑龙江,哈尔滨,150086
5. 黑龙江省农业科学院,畜牧研究中心博士后工作站,黑龙江,哈尔滨,150086;中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
基金项目:国家自然科学基金 , 中国农业科学院所长基金 , 黑龙江省博士后科研启动基金
摘    要:为了制备乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位特异性单克隆抗体,将编码乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39的DNA序列进行人工合成,随后插入表达载体pGEX-6p-1的限制性酶切位点BarnH I与Xho I之间,构建了表位肽与GST的融合表达质粒.该表位融合蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合.以化学合成的E39表位多肽为抗原,对融合细胞上清进行间接ELISA筛选.结果,筛选出1株分泌E39表位特异性抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞分泌抗体能力稳定.经鉴定,该单克隆抗体亚型为IgG2b,轻链类型为k链.结果表明,用表位融合蛋白为抗原可以制备表位特异性单克隆抗体.

关 键 词:乙型脑炎病毒  E蛋白  单克隆抗体  表位  乙型脑炎  病毒  蛋白  抗原表位  单克隆抗体  envelope protein  specific  monoclonal antibody  Preparation  virus  Japanese encephalitis  类型  轻链  抗体亚型  稳定  能力  细胞分泌  杂交瘤细胞株  表位特异性抗体  结果
文章编号:1673-4696(2008)02-0133-04
修稿时间:2007-10-29

Preparation of monoclonal antibody specific to envelope protein epitope E39 of Japanese encephalitis virus
HUA Rong-hong,WANG Bin,CHEN Na-sha,YU Hai,LIU Tian-qiang,MA Hong,LIU Di,TONG Guang-zhi. Preparation of monoclonal antibody specific to envelope protein epitope E39 of Japanese encephalitis virus[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(2): 133-136
Authors:HUA Rong-hong  WANG Bin  CHEN Na-sha  YU Hai  LIU Tian-qiang  MA Hong  LIU Di  TONG Guang-zhi
Abstract:
Keywords:
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