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亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析
引用本文:董金杰,王永录,张永光,伏小平,潘丽,方玉珍,蒋守田,王宝琴,王文秀. 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析[J]. 中国兽医科学, 2005, 35(6): 461-464
作者姓名:董金杰  王永录  张永光  伏小平  潘丽  方玉珍  蒋守田  王宝琴  王文秀
作者单位:1. 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070;中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046
2. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046
3. 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070
4. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095
5. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA24110)
摘    要:提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA,用特异性引物通过RTPCR反应获得了约750bp的核酸片段,将其与pGEMTEasy载体连接,并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序,证明所克隆的片段含有完整的VP1基因;将重组质粒与表达载体pcDNA3.1( )分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后连接,构建成重组表达质粒,转化宿主菌DH5α,筛选阳性克隆。测序结果证明,目的基因正确插入到表达载体中,命名为pcDNAV;用同样方法将IL18基因插入pcDNAV中,命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠,2周后加强免疫1次,每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明,pcDNAVI可引发机体产生体液免疫。

关 键 词:口蹄疫病毒  亚洲Ⅰ型  VP1基因  真核表达载体
文章编号:1000-6419(2005)06-0461-04
修稿时间:2005-04-15

Construction of recombinant plasmid with VP1 gene against Asia I FMDV and elementary analysis of its immunological activity
DONG Jin-jie,WANG Yong-lu,ZHANG Yong-guang,FU Xiao-ping,PAN Li,Fang Yu-zhen,JIANG Shou-tian,WANG Bao-qin,WANG Wen-xiu. Construction of recombinant plasmid with VP1 gene against Asia I FMDV and elementary analysis of its immunological activity[J]. Chinese Veterinary Science, 2005, 35(6): 461-464
Authors:DONG Jin-jie  WANG Yong-lu  ZHANG Yong-guang  FU Xiao-ping  PAN Li  Fang Yu-zhen  JIANG Shou-tian  WANG Bao-qin  WANG Wen-xiu
Affiliation:DONG Jin-jie~1,2,WANG Yong-lu~2,ZHANG Yong-guang~2,FU Xiao-ping~1,PAN Li~2,FANG Yu-zhen~2,JIANG Shou-tian~2,WANG Bao-qin3,WANG Wen-xiu4
Abstract:
Keywords:
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