猪圆环病毒2型抗原乳胶免疫层析试纸的构建与应用

为构建一种强特异性、高灵敏度、检测快速、操作简便的猪圆环病毒2型（PCV2）抗原诊断方法，本研究通过原核表达系统表达Cap蛋白并制备相应的多克隆抗体。用多克隆抗体和乳胶微球制备免疫探针，将单克隆抗体和羊抗兔二抗分别包被于硝酸纤维膜（NC膜）上的检测线（T线）和质控线（C线）。对工艺参数进行优化后进行试纸条的性能验证，结果显示，该试纸仅在PCV2抗原阳性血清下呈现阳性结果，与其他病毒抗原阳性血清无交叉反应；检出限为0.5 ng/m L；对150份临床样本进行检测，以PCR检测试剂盒的结果为金标准，试纸条的样本检出率为93.33%(140/150)；该试纸在常温、20%湿度环境下可保存至少12个月。结果表明，本研究构建的PCV2抗原检测试纸具有强特异性、高灵敏度、良好稳定性、检测快速、操作简便的特点，可用于猪圆环病毒2型感染的早期诊断，对猪圆环病毒2型的预防具有重要意义。