副流感病毒5型RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为了精准和快速检测副流感病毒5型(PIV5)，本研究下载NCBI中发布的不同物种来源的25株PIV5全基因序列，对比后选择高度保守的NP基因序列区段设计特异性引物，建立了检测PIV5的RT-PCR方法。结果显示，建立的方法具有较强的敏感性和特异性，可扩增出115 bp大小的片段。敏感性结果显示，核酸最低检测量为7.93×10⁵copies/μL，与牛副流感3型病毒等8种临床常见病毒均无交叉反应。分别采集猪、牛及犬的临床样品共40份进行检测，阳性率为20%，表明建立的RT-PCR方法可用于临床上副流感病毒的检测。