伊氏锥虫PFR2蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

为了探究伊氏锥虫副鞭毛杆蛋白2(paraflagellar rod protein 2,PFR2)的分子特征和免疫特征，利用PCR扩增伊氏锥虫PFR2基因，将扩增产物插入p QE-80L载体，经原核表达后，将纯化后的重组蛋白免疫小鼠，制备多克隆抗体，利用Western-blot鉴定反应原性。结果表明，PFR2基因大小为1 803 bp，编码含601个氨基酸残基的蛋白质，SDS-PAGE电泳显示该蛋白大小约为66 ku，主要以包涵体的形式表达。用间接ELISA方法检测小鼠抗PFR2多克隆抗体的效价为1∶25 600;Western-blot检测显示重组PFR2蛋白具有较好的反应原性。本研究为进一步研究伊氏锥虫PFR2蛋白的功能奠定了基础。