致病性猪圆环病毒基因分型三重荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种同时鉴别致病性猪圆环病毒(PCV)不同型的检测方法，本研究对PCV2、PCV3、PCV4各自Rep基因进行特异性保守序列分析，建立了致病性PCV的TaqMan单重和三重荧光定量PCR检测方法。该方法能特异性区分PCV2、PCV3和PCV4，与PCV1及PRV等临床上常见的猪传染性病原均无交叉反应。建立的单重及三重PCR方法的最低检测限度均为10¹copies∕μL，组内及组间的变异系数均小于1%，表明重复性良好。对354份猪临床组织病料进行三重荧光定量PCR检测，结果显示，PCV2、PCV3和PCV4的阳性率分别为66.7%、26.8%和0;PCV2和PCV3共感染率为15.8%。结果表明，本研究建立的三重荧光定量PCR方法能准确鉴别致病性PCV，灵敏性优于普通PCR法，检测过程更高效、便捷，为致病性PCV的临床诊断及流行病学调查提供了检测工具。