弓形虫VEG株ROP16蛋白对THP-1细胞免疫调节及机制研究

为了探究弓形虫VEG株ROP16蛋白在THP-1细胞中的表达及对其免疫反应的影响和相关机制，本研究利用慢病毒构建过表达ROP16(overEep-ROP16)载体，空载体（overEep-NC）为对照，通过转染THP-1细胞构建稳转细胞株，对其荧光蛋白表达情况、ROP16在THP-1细胞中的表达及定位进行检测；通过RT-PCR检测炎性因子IL-1β、IL-18、TNF-α、IL-10、IL-12 mRNA相对表达水平；Western-blot方法检测炎性小体NLRP3、Caspase-1蛋白与信号通路蛋白STAT3、pTyr705-STAT3的表达水平。结果显示，构建的过表达ROP16重组慢病毒转染THP-1细胞后可观察到强绿色荧光，在THP-1细胞中rop16基因在mRNA与蛋白水平均成功表达且该蛋白定位于THP-1细胞核；与对照组相比，过表达组促炎细胞因子IL-1β、IL-18、TNF-α mRNA表达水平上调（P<0.01），而IL-12 mRNA下调（P<0.01），抗炎细胞因子IL-10 mRNA上调（P<0.01），炎性小体NLRP3、Caspase-1蛋...