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PCV2型和PCV3型双重荧光RAA鉴别检测方法的建立和应用
作者姓名:吴江  林彦星  黄超华  曹琛福  刘明如  陈鹏  陈兵  阮周曦  张彩虹  曾少灵  史卫军  杨俊兴  花群义
作者单位:1. 深圳海关动植物检验检疫技术中心;2. 深圳市绿诗源生物技术有限公司;3. 深圳市心月生物科技有限公司
基金项目:“十四五”国家重点研发计划项目(2021YFD1801203);
摘    要:本研究基于猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的Cap基因保守序列设计引物,利用双重重组酶介导等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)技术,建立了一种快速鉴别检测PCV2和PCV3的方法。结果显示,该方法特异性强,检测CSFV、PRV、FMDV和SVA病毒核酸时呈阴性反应;灵敏度高,PCV2和PCV3的最低检测限分别为481 copies/μL和583 copies/μL;本方法简便快速,反应时间短(小于15 min),重复性好。使用建立的方法对132份临床样品进行检测,结果与实时荧光PCR方法相符。上述结果表明,本研究建立的双重RAA方法操作简单、反应快速、结果可靠,适用于现场和实验室对PCV2和PCV3的快速鉴别检测。

关 键 词:猪圆环病毒2型  猪圆环病毒3型  重组酶介导等温扩增方法(RAA)
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