猫传染性腹膜炎病毒S1蛋白的截短表达及其单克隆抗体的研制

为制备猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）S1蛋白的单克隆抗体，本研究通过大肠杆菌表达系统截短表达了FIPV S1蛋白（rS1）并进行纯化，以rS1免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合和间接ELISA方法筛选到3株能稳定分泌针对rS1抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为2D7、3D8、5G1。抗体亚型鉴定结果表明，2D7、5G1株抗体亚型为Ig G2a,3D8株抗体亚型为Ig G1，轻链均为κappa链；杂交瘤细胞染色体组型鉴定结果显示，3株杂交瘤细胞染色体数分别为102、103、100条，属于杂交瘤染色体组型；小鼠腹水的间接ELISA抗体效价可达1∶204 800。对小鼠腹水进行单克隆抗体纯化和鉴定，Western-blot结果显示，3株单克隆抗体均可与rS1发生特异性反应；IFA结果显示，3株单克隆抗体均能特异性识别细胞中的FIPV。上述结果表明，本研究获得了3株性能良好的抗rS1的单克隆抗体，为后期FIPV的早期诊断以及FIPV生物学功能的研究奠定了重要的物质基础。