非洲猪瘟MGF360-11L蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

本研究根据非洲猪瘟病毒（ASFV）HLJ/2018株（GenBank登录号：MK333180）MGF360-11L核苷酸序列，合成MGF360-11L基因序列，将其克隆至pET-32a（+）载体。测序正确后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化，纯化后的重组蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。以纯化的MGF360-11L重组蛋白作为包被抗原，建立了检测ASFV MGF360-11L抗体的间接ELISA方法。用建立的间接ELISA方法与法国ID-Vet非洲猪瘟抗体检测试剂盒分别对192份临床血清样品进行检测比较，结果显示，该间接ELISA方法的特异性为91.6%，敏感性为92.1%，符合率约为91.7%。表明，该间接ELISA方法敏感性高、重复性好和特异性强，可初步用于临床血清样品非洲猪瘟抗体的检测，该方法的建立为ASFV的快速诊断提供了更多选择，对非洲猪瘟的防控提供了技术支持。