| 鸡β-防御素-8 cDNA在大肠杆菌中的融合表达 |
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| 引用本文： | 杨涛,钟瑾,涂健,彭开松,祁克宗. 鸡β-防御素-8 cDNA在大肠杆菌中的融合表达[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(11) |
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| 作者姓名： | 杨涛 钟瑾 涂健 彭开松 祁克宗 |
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| 作者单位： | 杨涛,涂健,彭开松,祁克宗(安徽农业大学,动物科技学院,安徽,合肥,230036);钟瑾(中国科学院,微生物研究所,北京,100101) |
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| 基金项目： | 国家"十一五"高技术研究发展计划(863)项目，国家自然科学基金项目，高等学校省级优秀青年人才基金项目 |
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| 摘 要： | 为了评价鸡β-防御素的功能与基因工程化生产的可能性,从已构建的重组载体pGEM-T Easy-gal-8中克隆gal-8成熟肽cDNA,将该cDNA插入原核表达载体pGEX-6P-1中,构建表达质粒pGEX-6P-1-gal-8,然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中.挑取阳性克隆菌用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果检测显示,融合表达的GST-gal-8蛋白大小约30 ku,经灰度扫描显示该融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的119 mg/L.用固定化的谷胱甘肽亲和层析柱进行蛋白纯化,融合蛋白经Prescission蛋白酶酶切并纯化获得了完整的gal-8成熟多肽.抑菌活性试验显示,表达的gal-8成熟肽对黄色微球菌有一定的抑菌活性.
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| 关 键 词： | β-防御素-8 融合表达 Prescission蛋白酶 gal-8成熟肽 |
Fusion expression of gallinacin-8 cDNA in Escherichia coil |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gal-8 fusion expression Prescission protease gal-8 mature peptide |
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