| 同源重组技术在拯救猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用 |
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| 引用本文： | 周艳,郑海红,孙志,黄婷,袁世山. 同源重组技术在拯救猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用[J]. 中国兽医科学, 2011, 0(10) |
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| 作者姓名： | 周艳 郑海红 孙志 黄婷 袁世山 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所;南京农业大学动物医学院预防兽医学系; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年科学基金项目(30901078) |
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| 摘 要： | 为探寻猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组的规律和机制,在反向遗传学技术平台基础上,设计了几对作为配体和供体的复制子质粒,相应配对后共转染Mar-c145细胞,经原代或传代培养后拯救出病毒,并对拯救病毒的序列进行了比对分析。结果显示,拯救的病毒为重组子,共含有供体和配体亲本部分序列;在配体和供体的同源序列区发生了分子间同源重组;重组区域存在着一定的随机性,分别依次在ORF1的256～318 nt区域、ORF5的13970～13992 nt、ORF6的14428～14494 nt及ORF7的15135～15161 nt区域发生了重组。本研究利用同源重组技术建立的重组体系,不仅揭示病毒重组区域具有随机性,而且也为其他RNA病毒的感染性cDNA克隆的构建提供了一种方法。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 反向遗传操作 复制子 共转染 |
Application of homologous recombination technique in rescuing PRRSV |
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| ZHOU Yan,ZHENG Hai-hong,SUN Zhi,HUANG Ting,YUAN Shi-shan. Application of homologous recombination technique in rescuing PRRSV[J]. Chinese Veterinary Science, 2011, 0(10) |
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| Authors: | ZHOU Yan ZHENG Hai-hong SUN Zhi HUANG Ting YUAN Shi-shan |
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| Affiliation: | ZHOU Yan1,ZHENG Hai-hong1,SUN Zhi1,HUANG Ting2,YUAN Shi-shan1(1.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,China,2.Department of Prevention Veterinary,College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China) |
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| Abstract: | To investigate the mechanism of PRRSV recombination,which is a way of viral variation,we constructed a recombination system and homologous recombination technique.Based on our reverse genetic technique and by using homologous recombination technique in rescuing PRRSV recombinants,we co-transfected several pairs of replicons to Marc-145 cells.Results showed that the rescued recombinants contained parental part sequences of donor and receptor.Homologous sequences shared in a pair of replicons and intermolecul... |
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| Keywords: | PRRSV reverse genetic manipulation replicon cotransfection |
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