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| 猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达 | |
| 引用本文： | 蒋智勇,宋长绪,高向阳,王贵平,赵亚华. 猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达[J]. 中国兽医科学, 2004, 34(5): 3-7 |
| 作者姓名： | 蒋智勇 宋长绪 高向阳 王贵平 赵亚华 |
| 作者单位： | 1. 广东省农业科学院,兽医研究所,广东,广州,510640;华南农业大学,生命科学学院,广东,广州,510642 2. 广东省农业科学院,兽医研究所,广东,广州,510640 3. 华南农业大学,生命科学学院,广东,广州,510642 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (86 3)项目 (2 0 0 3AA2 4 1110 )，广东省农业攻关项目 (2 0 0 3B2 14 0 4 ) |
| 摘 要： | 根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )的ORF1基因序列 ,设计合成了 1对引物 ,对PCV 2广东株 (GD)ORF1基因进行PCR扩增 ,将扩增的ORF1基因克隆入 pMD 18 T载体 ,获得的重组质粒命名为 pMD ORF1。将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/ gⅢC得到重组子 ,命名为 pBAD/ gⅢ ORF1。序列分析表明 ,克隆的ORF1与德国分离株AF2 0 1897核苷酸序列的同源性高达 99.5 % ;与其他PCV 2株的核苷酸序列同源性为 92 .1%～99.9% ,推导的氨基酸序列同源性为 90 .2 %～ 99.5 %。同时 ,测序结果表明 ,克隆的ORF1准确插入了 pBAD/ gⅢC的多克隆位点 ,未改变读码框。用L 阿拉伯糖诱导表达 ,收集菌液进行SDS PAGE和Western blotting分析 ,结果表明PCV 2ORF1在pBAD/ gⅢC中获得了高效融合表达 ,其表达蛋白的分子质量约为 4 1ku。 |
| 关 键 词： | 猪2型圆环病毒 ORF1基因 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2004)05-0003-05 |
| 修稿时间： | 2003-12-22 |
Cloning and sequence analysis of ORF1 gene of porcine circovirus type 2 |
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| JIANG Zhi-yong. Cloning and sequence analysis of ORF1 gene of porcine circovirus type 2[J]. Chinese Veterinary Science, 2004, 34(5): 3-7 | |
| Authors: | JIANG Zhi-yong |
| Affiliation: | JIANG Zhi-yong~ |
| Abstract: | |
| Keywords: | porcine circovirus type 2 ORF1 gene cloning expression |
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