猪库布病毒纳米PCR快速检测方法的建立

为了给临床检测猪库布病毒(PKV)提供更加准确便捷的检测方法，本试验设计了1对特异性引物，扩增PKV基因组的VP0区域。在传统PCR反应体系中添加纳米金颗粒材料，优化后建立了一种方便快捷且特异检测PKV的nano-PCR方法。结果显示，该方法能特异性扩增猪库布病毒，与猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪轮状病毒、猪札幌病毒均无交叉反应。nano-PCR相对于普通PCR表现出更高的敏感性，普通PCR的最低核酸检测浓度为5.61×10^-7ng/μL，而nano-PCR的最低核酸检测浓度为5.61×10^-10ng/μL，敏感性提高了1 000倍。对来自不同发病猪场30份腹泻猪的粪便和血液临床样本的检测结果显示，nano-PCR阳性检出率为23.33%(7/30)，普通PCR阳性检出率为16.66%(5/30)。结果表明，本试验建立的nano-PCR方法在猪库布病毒的检测中表现出更高的特异性和敏感性，对猪库布病毒的快速诊断和检测具有重要的临床意义。