伪狂犬病病毒UL36蛋白单克隆抗体的制备和鉴定 |
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作者姓名: | 陈玲超 王兴娅 李俊波 李佳佳 王晨 李松楠 王安铖 孟鑫 童武 孔宁 于海 单同领 童光志 郑浩 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院上海兽医研究所;2. 安徽农业大学生命科学院;3. 东北林业大学野生动物学院;4. 安徽农业大学动物科技学院 |
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基金项目: | 上海市科技创新行动计划项目(20392002500); |
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摘 要: | 伪狂犬病病毒UL36基因编码的皮层蛋白VP1/2在病毒粒子组装过程中发挥重要作用。本试验以UL36基因为研究对象,将截短的UL36基因克隆入载体pCold I,构建了重组原核表达质粒pCold I-UL36。经诱导表达,将包涵体形式表达的重组蛋白经过变性、亲和层析及复性后获得了纯度较高的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合和间接ELISA方法筛选出1株能稳定分泌针对UL36蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,被命名为UL36-6,抗体亚型鉴定结果为Ig G1和κ,制备的腹水抗体中和效价及纯度高,Western-blot和间接免疫荧光试验结果表明单克隆抗体具有很好的特异性。综上所述,本研究成功制备出1株针对PRV UL36蛋白的单克隆抗体,为深入研究UL36蛋白的生物学功能奠定了基础。
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关 键 词: | 伪狂犬病病毒 UL36基因 VP1/2 单克隆抗体 |
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