| 鸡骨钙素多克隆抗体及其间接竞争ELISA试剂盒的制备与应用 |
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| 引用本文： | 江莎,孟凡,吴晓丹,高强,侯加法. 鸡骨钙素多克隆抗体及其间接竞争ELISA试剂盒的制备与应用[J]. 中国兽医科学, 2012, 0(10): 1058-1062 |
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| 作者姓名： | 江莎 孟凡 吴晓丹 高强 侯加法 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972234,30671546);江苏省普通高校研究生科研创新项目(CXZZ11-0681);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) |
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| 摘 要： | 为了建立鸡骨钙素间接竞争ELISA检测方法,使用原核表达的重组鸡骨钙素蛋白作为免疫原,免疫4只雄性新西兰大白兔,成功获得兔抗鸡骨钙素多克隆抗体。该抗体能用于Western-blot检测天然骨钙素。以天然提取的鸡骨钙素为包被抗原,葡聚糖A亲和纯化后的兔抗鸡骨钙素多克隆抗体为一抗建立ELISA反应。结果,最佳包被抗原浓度为0.5μg/mL,最佳抗体工作浓度为1∶10 000,标准品浓度在50～0.39ng/mL间,具有较好的线性关系,检测下限为0.34,批间变异系数和批内变异系数分别为10.6%和4%。使用制备的试剂盒测定30个鸡血清样本及其倍比稀释后的血清样本;结果,鸡血清骨钙素浓度为4.42～19.83ng/mL,稀释前与稀释后测定的血清样本浓度相关性r2=0.952。结果表明,制备的鸡骨钙素间接竞争ELISA试剂盒可用于定量检测鸡血清骨钙素含量。
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| 关 键 词： | 骨钙素 多克隆抗体 ELISA 间接竞争 |
Preparation and application of chicken osteocalcin polyclonal antibody and its indirect competitive ELISA kit |
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| JIANG Sha,MENG Fan,WU Xiao-dan,GAO Qiang,HOU Jia-fa. Preparation and application of chicken osteocalcin polyclonal antibody and its indirect competitive ELISA kit[J]. Chinese Veterinary Science, 2012, 0(10): 1058-1062 |
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| Authors: | JIANG Sha MENG Fan WU Xiao-dan GAO Qiang HOU Jia-fa |
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| Affiliation: | (College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China) |
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