| 乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 王桂荣,严作廷,王东升,米宝明,崔燕. 乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(6) |
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| 作者姓名： | 王桂荣 严作廷 王东升 米宝明 崔燕 |
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| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070
2. 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃,兰州,730050 |
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| 基金项目： | 中央级科研单位基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计了1对引物,用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA,经RT-PCR扩增,将克隆的抗菌肽BNBD5基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pET30a中,经IPTG诱导原核表达,通过Western-blot检测融合蛋白BNBD5的表达水平.结果表明,RT-PCR扩增出的cDNA片段长138 bp,编码45个氨基酸的多肽,多肽中合6个保守半胱氨酸残基.用Blast程序进行检索比较显示,克隆出了牛防御素家族成员BNBD5基因,并成功构建了pET30a-BNBD5载体,经IPTG诱导,pET30a-BNBD5原核表达产物的相对分子质量约为10 ku,与预期的融合蛋白大小一致,证实构建的重组质粒能够在大肠杆菌中表达.
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| 关 键 词： | 乳牛 子宫内膜抗菌肽 BNBD5基因 克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of endometrial antibacterial peptide BNBD5 gene of dairy cow |
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| WANG Gui-rong,YAN Zuo-ting,WANG Dong-sheng,MI Bao-ming,CUI Yan. Cloning and prokaryotic expression of endometrial antibacterial peptide BNBD5 gene of dairy cow[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(6) |
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| Authors: | WANG Gui-rong YAN Zuo-ting WANG Dong-sheng MI Bao-ming CUI Yan |
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