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猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性
引用本文:窦永喜,翟军军,李健,潘晓梅,景志忠,才学鹏. 猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(6)
作者姓名:窦永喜  翟军军  李健  潘晓梅  景志忠  才学鹏
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) , 甘肃省重大科技专项
摘    要:依照猪IFN-γ(pIFN-γ)成熟蛋白基因序列设计引物,将已扩增的pIFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了GST-pIFN-γ融合表达载体,该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了筛选和优化,筛选出最佳诱导表达条件后大量诱导表达,可溶性的表达产物经GST琼脂糖凝胶亲和纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化.经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实得到了高纯度的融合蛋白,该蛋白的分子质量为42ku.选择FMDV和PRV两种不同的病毒(RNA病毒和DNA病毒)进行GST-pIFN-γ抗病毒活性测定.结果表明,GST-pIFN-γ融合蛋白可有效抑制这两种病毒引起的细胞病变,其对FMDV的抑制作用远远大于对PRV的抑制.对GST-pIFN-γ融合蛋白的稳定性及机体毒副作用的研究表明,该pIFN-γ的稳定性有较大提高,而毒副作用大大降低.

关 键 词:  IFN-γ基因  融合表达  蛋白纯化  生物学活性  γ基因  融合表达  生物学特性  protein  bioactivities  gene  porcine  expression  研究  毒副作用  机体  稳定性  抑制作用  细胞  结果  活性测定  病毒  FMDV  选择  分子质量

Fusion expression of porcine interferon-gamma protein gene and bioactivities of its expressed protein
DOU Yong-xi,ZHAI Jun-jun,LI Jian,PAN Xiao-mei,JING Zhi-zhong,CAI Xue-peng. Fusion expression of porcine interferon-gamma protein gene and bioactivities of its expressed protein[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(6)
Authors:DOU Yong-xi  ZHAI Jun-jun  LI Jian  PAN Xiao-mei  JING Zhi-zhong  CAI Xue-peng
Abstract:
Keywords:
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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