| 猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性 |
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| 引用本文： | 窦永喜,翟军军,李健,潘晓梅,景志忠,才学鹏. 猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(6) |
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| 作者姓名： | 窦永喜 翟军军 李健 潘晓梅 景志忠 才学鹏 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) , 甘肃省重大科技专项 |
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| 摘 要： | 依照猪IFN-γ(pIFN-γ)成熟蛋白基因序列设计引物,将已扩增的pIFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了GST-pIFN-γ融合表达载体,该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了筛选和优化,筛选出最佳诱导表达条件后大量诱导表达,可溶性的表达产物经GST琼脂糖凝胶亲和纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化.经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实得到了高纯度的融合蛋白,该蛋白的分子质量为42ku.选择FMDV和PRV两种不同的病毒(RNA病毒和DNA病毒)进行GST-pIFN-γ抗病毒活性测定.结果表明,GST-pIFN-γ融合蛋白可有效抑制这两种病毒引起的细胞病变,其对FMDV的抑制作用远远大于对PRV的抑制.对GST-pIFN-γ融合蛋白的稳定性及机体毒副作用的研究表明,该pIFN-γ的稳定性有较大提高,而毒副作用大大降低.
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| 关 键 词： | 猪 IFN-γ基因 融合表达 蛋白纯化 生物学活性 γ基因 融合表达 生物学特性 protein bioactivities gene porcine expression 研究 毒副作用 机体 稳定性 抑制作用 细胞 结果 活性测定 病毒 FMDV 选择 分子质量 |
Fusion expression of porcine interferon-gamma protein gene and bioactivities of its expressed protein |
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| DOU Yong-xi,ZHAI Jun-jun,LI Jian,PAN Xiao-mei,JING Zhi-zhong,CAI Xue-peng. Fusion expression of porcine interferon-gamma protein gene and bioactivities of its expressed protein[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(6) |
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| Authors: | DOU Yong-xi ZHAI Jun-jun LI Jian PAN Xiao-mei JING Zhi-zhong CAI Xue-peng |
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