| 联合表达PPV VP2和PCV2 ORF2基因的重组PRV的构建 |
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| 引用本文： | 徐志文,郭万柱,陈杨,石恬,朱玲,王印,张博,王小玉. 联合表达PPV VP2和PCV2 ORF2基因的重组PRV的构建[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(10) |
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| 作者姓名： | 徐志文 郭万柱 陈杨 石恬 朱玲 王印 张博 王小玉 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物生物技术中心,四川,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项日，国家"十一五"科技支撑计划项目，教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目，四川省教育厅重点实验室专项 |
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| 摘 要： | 将包含有完整阅读框架的PPV VP2基因(1 740 bp)和PCV2 ORF2基因(750 bp)插入真核表达载体pPI-2.EGFP中,构建了重组质粒pPI-2.EGFP.VP2.ORF2.采用脂质体介导法将重组质粒的DNA和PRV SA215株的DNA共转染Vero细胞,转染后20 h出现带荧光的空斑,挑斑纯化后繁殖,并收获病毒液.PCR和免疫荧光试验结果证实,成功构建了重组病毒,将其命名为PRV SA215(D1)株.细胞培养特性试验结果显示,重组病毒可以在Vero、MDBK、ST和IBRS-2等多种细胞上增殖,在Vero细胞上的增殖效价为1×106PFU.分别以1×106PFU/头、1×104PFU/头剂量接种28日龄仔猪,结果显示,免疫仔猪的PPV、PCV2抗体水平均逐渐升高,并分别从接种后第14 d和21 d开始,PPV、PCV2抗体转为阳性.此结果进一步佐证了重组PRV SA215(D1)株已构建成功.
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 猪圆环病毒2型 伪狂犬病痛毒 重组 免疫原性 |
Construction of recombinant pseudorabies virus co-expressing ORF2 gene of porcine circovirus type 2 and VP2 gene of porcine parvovirus |
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