| 绵羊PRNP等位基因PCR-SSCP分析条件的优化 |
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| 引用本文： | 赵春林,WANG Chuan,吴润,LI Fa-di,柳纪省. 绵羊PRNP等位基因PCR-SSCP分析条件的优化[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(8) |
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| 作者姓名： | 赵春林 WANG Chuan 吴润 LI Fa-di 柳纪省 |
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| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 教育部高等学校博士学科点专项科研基金，甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目，家畜疫病病原生物学国家重点实验室基金 |
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| 摘 要： | 为进行绵羊PRNP等位基因密码子136、154、171的多态性研究,建立适合于绵羊PRNP等位基因开放阅读框(ORF)内高变区PCR-SSCP分析方法,对凝胶浓度、交联度、甘油浓度、电泳电压、电泳时间、PCR产物与变性缓冲液比例、电泳缓冲液浓度、上样量等影响因素进行了优化试验.在优化中引入了正交试验法,以使优化过程简化,结果可靠.结果表明,交联度49:1、甘油浓度0%、凝胶浓度12%、电泳电压200 V、PCR产物上样量≥2.0μL且<4.0μL、PCR产物与变性缓冲液比例1:4、0.5×TBE缓冲液及4℃电泳45 h为最佳试验条件,据此建立了绵羊PRNP等位基因136、154、171密码子的PCR-SSCP分析方法.
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| 关 键 词： | 绵羊 PRNP等位基因 聚合酶链式反应-单链构象多态性 正交试验 分析条件优化 |
Optimization of PCR-SSCP conditions for analysis of ovine PRNP allele |
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| ZHAO Chun-lin,WANG Chuan,WU Run,LI Fa-di,LIU Ji-xing. Optimization of PCR-SSCP conditions for analysis of ovine PRNP allele[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(8) |
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| Authors: | ZHAO Chun-lin WANG Chuan WU Run LI Fa-di LIU Ji-xing |
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