家兔皮肤真菌双重SYBR GreenⅠ定量PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 刘利强,张欣,刘娜,刘建钗,刘月,刘彦威,沈洁.家兔皮肤真菌双重SYBR GreenⅠ定量PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2018(3). |
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作者姓名: | 刘利强 张欣 刘娜 刘建钗 刘月 刘彦威 沈洁 |
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作者单位: | 河北工程大学生命科学与食品工程学院;邯郸市动物医学重点实验室; |
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摘 要: | 为建立家兔皮肤真菌快速检测方法,根据GenBank相关基因,分别设计皮肤真菌和须癣毛癣菌这2对特异引物,建立了皮肤真菌和须癣毛癣菌双重SYBR GreenⅠ定量PCR方法。结果显示,在熔解温度86~86.5℃和88.5~89℃分别出现皮肤真菌和须癣毛癣菌特异波峰,且与其他真菌没有交叉反应;重复试验变异系数为0~0.32%;最低检测浓度为3.3×10/mL;分离菌株样本与病料样本双重SYBR GreenⅠ定量PCR检测结果一致。结果表明,本试验建立的双重SYBR GreenⅠ定量PCR方法特异、稳定、敏感,可以用于临床样品的检测。
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