| 猪生殖与呼吸综合征病毒的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR检测 |
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| 引用本文： | 王小武,符芳,许红喜,周艳君,童光志,李曦.猪生殖与呼吸综合征病毒的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR检测[J].中国兽医科学,2008,38(5):401-406. |
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| 作者姓名： | 王小武 符芳 许红喜 周艳君 童光志 李曦 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 黑龙江八一农垦大学,黑龙江,大庆,163319 |
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| 摘 要： | 根据猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白基因核酸序列设计引物,经BLAST比较发现,该引物既可以扩增较早发现的PRRSV毒株,也可以扩增近期发现的在Nsp2基因上有较大变异的PRRSV毒株,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为标准品建立了检测PRRSV的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR方法.结果表明,该方法标准曲线的相关系数大于0.99,敏感性可以达到1×101拷贝/μL,约为普通PCR的100倍;用该方法检测人工感染PRRSV的猪全血,结果阳性检出率为100%.敏感性、特异性和稳定性试验表明,该方法具有很高的敏感性、特异性和稳定性,可以用来快速检测PRRSV.
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| 关 键 词： | 猪生殖与呼吸综合征病毒 SYBR Green-Ⅰ 荧光定量PCR 猪生殖与呼吸综合征 病毒 SYBR 荧光定量 快速检测 Establishment virus syndrome respiratory porcine detection quantitative 稳定性试验 阳性检出率 猪全血 人工感染 拷贝 敏感性 相关系数 标准曲线 |
| 文章编号： | 1673-4696(2008)05-0401-06 |
| 修稿时间： | 2007年11月15 |
Establishment of SYBR Green-Ⅰ real-time fluorescent quantitative PCR for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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| WANG Xiao-wu,FU Fang,XU Hong-xi,ZHOU Yan-jun,TONG Guang-zhi,LI Xi.Establishment of SYBR Green-Ⅰ real-time fluorescent quantitative PCR for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Veterinary Science in China,2008,38(5):401-406. |
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| Authors: | WANG Xiao-wu FU Fang XU Hong-xi ZHOU Yan-jun TONG Guang-zhi LI Xi |
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